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BALB/3T3 clone A31 (小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)
| 型 號(hào)： | |
| 報(bào) 價(jià)： | 1 |
BALB/3T3 clone A31 (小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)正在出售的產(chǎn)品：HT-1080(人纖維肉瘤細(xì)胞) LX-2, 人肝星形細(xì)胞株 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KM9401 HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/USSR/90/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 HAVCR1
BALB/3T3 clone A31 (小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)
商品屬性
鑒定 | STR鑒定正確 | 種屬 | 小鼠 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 分類(lèi) | 小鼠細(xì)胞系 |
商品介紹
別稱(chēng) BALB/c 3T3 clone A31; Balb/c3T3; Balb/c 3T3; BALB/3T3; Balb/3T3-4-Cl31; 3T3 clone A31; BALB/3T3 cl. A31; BALB 3T3 clone A31; BALB/3T3 (clone A31); B/C3T3; 3T3-A31; 3T3(A31)
種屬 小鼠
年齡（性別） 胚胎，懷孕14-17天
組織來(lái)源 胚胎；成纖維細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
參考資料(來(lái)源文獻(xiàn))
BALB/3T3 clone A31細(xì)胞是由S·A·Aaronson和G·T·Todaro于1968年從裂解的14-17天的BALB/c小鼠胚胎中建立的幾株細(xì)胞之一。BALB/3T3 clone A31細(xì)胞對(duì)接觸抑制特別敏感，生長(zhǎng)需高倍數(shù)稀釋?zhuān)柡蜐舛鹊汀４送?，BALB/3T3 clone A31細(xì)胞對(duì)癌基因DNA病毒SV40和小鼠肉瘤病毒高度易感。 |
生物安全等級(jí) 1
生長(zhǎng)培養(yǎng)基 DMEM＋10% FBS＋1% P/S
推薦傳代比例 1:2-1:3
推薦換液頻率 2~3次/周
凍存條件
凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養(yǎng)條件
氣相：空氣，95%；CO2，5%
溫度：37℃
細(xì)胞處理：
1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來(lái)終止消化。
3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA 試劑盒
Human visceral adipose specific serine protease inhibitor (vaspin) ELISA Kit 人內(nèi)臟脂肪特異性絲蛋白酶抑制劑(vaspin)檢測(cè)試劑盒
Humanpan-cytokeratin,P-CKELISAKit 人廣譜細(xì)胞角蛋白(P-CK)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
GuineapigGrowthhormone,GH檢測(cè)試劑盒豚鼠生長(zhǎng)激素(GH)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
真菌/酵母酸性0酸酶總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
Mousec-fosELISAKit小鼠c-fos檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
DDR1重組小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
蛋白激酶Cδ(PKCδ)重組蛋白 Recombinant Protein Kinase C Delta (PKCd)
AHSP重組人 AHSP / ERAF 蛋白 Protein
IL21R Protein Human 重組人 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白
FGFR4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
A/H1N1-M2 Swine(Avian influenza Matrix Protein-2 Swine 0.5mgA/H1N1-M2 Swine(Avian influenza Matrix Protein-2 Swine) A型豬流感病毒H1N1-M2蛋白
IL21R Protein Human 重組人 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白
CDH1重組小鼠 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 蛋白 Protein
EFNB1 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
USP46重組人 / 小鼠 USP46 蛋白 (SUMO 標(biāo)簽) Protein
BALB/3T3 clone A31 (小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)豚鼠過(guò)氧化脂質(zhì)/乳過(guò)氧化物酶(LPO)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： LPO ELISA Kit
Human hepatitis D virus IgM (HDV IgM) ELISA Kit 人丁型肝IgM(HDV IgM)檢測(cè)試劑盒
Rabbitglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit 兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforbFGF(Humanbasicfibroblastgrowthfactor)ELISAKit人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子
細(xì)菌色酶原位染色檢測(cè)試劑盒20次
RabbitIerleukin10,IL-10ELISAKit兔子白介素10(IL-10)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
人總前列腺特異抗原(tPSA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人抗人類(lèi)免疫缺陷病毒抗體(HIV)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人復(fù)合前列腺特異性抗原(CPSA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
細(xì)胞接收后的處理：
1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
