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小鼠Smad 酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

小鼠Smad 酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

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小鼠Smad 酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格 詳細(xì)資料

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產(chǎn)品名稱:小鼠Smad 酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格
英文名稱: Smad ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
存儲(chǔ)條件:2-8℃
有效期:6個(gè)月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時(shí)檢測天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床 。

類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標(biāo)記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀以及檢測的具備條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測抗體、
(四)競爭法。
標(biāo)本要求
.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后5分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
技術(shù)流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時(shí),洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標(biāo)抗體:于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。

人磷酯酶Cγ鏈(PLCγ)ELISA試劑盒     英文名稱:    Human Phospholipase Cγ,PLCγ ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T    人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α(C/EBPα)ELISA Kit,48T/96T     進(jìn)口/原裝
人靶向核糖核酸酶(TR)ELISA試劑盒    英文名稱:    Human targeted ribonuclease, TR ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T    兔子B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA Kit,48T/96T     *
人甲基化酶(Methylase)ELISA試劑盒    英文名稱:    Human Methylase ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T    大鼠妊相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA Kit,48T/96T     進(jìn)口/原裝
人α肌動(dòng)蛋白(α Actin)ELISA試劑盒    英文名稱:    Human Alpha-Actin,α Actin ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T    牛α酸性糖蛋白(α-AGP)ELISA Kit,48T/96T     *
人REST協(xié)阻抑因子3(RCOR3)ELISA試劑盒    英文名稱:    human REST corepressor 3,RCOR3 ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T    兔子C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA Kit,48T/96T     進(jìn)口/原裝
人特異性巨噬細(xì)胞武裝因子(SMAF)ELISA試劑盒     英文名稱:    Human Specifie Macrophage Arming Paetot,SMAF ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T    兔脂蛋白α(Lp-α)ELISA Kit,48T/96T     *
人嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒    英文名稱:    Human eosinophil cationic protein,ECP ELISA Kit     規(guī)格:    96T/48T    裸鼠克拉拉細(xì)胞蛋白(CC6) ELISA Kit,48T/96T     進(jìn)口/原裝
輕鏈lambda(λ-IgLC)ELISA試劑盒     英文名稱:    Human lambda immunoglobulin light chain,λ-IgLC ELISA Kit    規(guī)格:    96T/48T    人抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb) ELISA Kit,48T/96T     *Scavenger Receptor BII  清道夫受體B2抗體     0.2ml    NRSF/REST  神經(jīng)元抑制蛋白抗體     0.ml
CIDE B  DNA斷裂因子相似蛋白B抗體     0.2ml    phospho-P53(Ser20)  磷酸化腫瘤抑制基因P53抗體     0.ml
KIF2B  有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白樣2B抗體     0.2ml    PCNA  增殖細(xì)胞核抗原抗體     0.ml
ZWINT  著絲粒ZW0相互作用蛋白抗體     0.2ml    Phospho-Pin (Ser6)  磷酸化肽基脯氨酞順反異構(gòu)酶Pinl抗體     0.ml
ANKRD3A  錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白3A抗體     0.2ml    Phospho-PKR (Thr45)  磷酸化蛋白激酶R抗體     0.ml
ARRDC3  抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體     0.2ml    phospho-c-Raf(Ser338/Tyr340)  磷酸化原癌基因c-Raf抗體     0.ml
COMMD3  銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體     0.2ml    S00A8  S00鈣結(jié)合蛋白A8抗體     0.ml
Phospho-CRMP2 (Thr54+Ser58)  磷酸化二氫嘧啶酶樣2抗體     0.ml    SLT/SLT-IIe/O39  豬水腫素(O39)菌體蛋白抗體     0.2ml
ROC/RNF75  環(huán)指蛋白75抗體     0.2ml    phospho-STAT3 (Ser727)  磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體     0.ml
Hairless  無毛發(fā)蛋白抗體     0.2ml    TTX(5E7)  河豚單克隆抗體     ml

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