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小鼠肥大細胞類(MCT)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

小鼠肥大細胞類(MCT)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

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小鼠肥大細胞類(MCT)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格 詳細資料

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產(chǎn)品名稱:小鼠肥大細胞類(MCT)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格
英文名稱: MCT ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
存儲條件:2-8℃
有效期:6個月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關蛋白無交叉反應。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床 。

小鼠肥大細胞類(MCT)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測抗體、
(四)競爭法。
小鼠肥大細胞類(MCT)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格標本要求
.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后5分鐘以內(nèi)進行。
小鼠肥大細胞類(MCT)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格技術流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標抗體:于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。

巴馬汀    英文名稱:    Martin    :    3486-67-7    分子式:    352.4    分子量:    C2H22NO4+
菝葜皂苷元    英文名稱:    Sarsasapogenin    :    26-9-2    分子式:    46.64    分子量:    C27H44O3
白果內(nèi)酯    英文名稱:    Bilobalide    :    33570-04-6    分子式:    326.29862    分子量:    C5H8O8
白花前胡丙素    英文名稱:    WhiteflowersbeforeHuBingsu    :    73069-27-9    分子式:    44.4078    分子量:    C22H22O8
白花前胡甲素    英文名稱:    WhiteflowersbeforeHuJiasu    :    73069-25-7    分子式:    398.4    分子量:    C22H22O7
白花前胡素D    英文名稱:    WhiteflowersD    :        分子式:    426.4624    分子量:    C24H26O7
白花前胡素E    英文名稱:    WhiteflowersE    :    72463-77-5    分子式:    428.4782    分子量:    C24H28O7
白樺脂    英文名稱:    Betulinicacid    :    472-5-    分子式:    456.70032    分子量:    C30H48O3
白屈菜紅堿    英文名稱:    Chelerythrine    :    3436-5-9    分子式:    348.3792    分子量:    C2H8NO4+
白屈菜堿    英文名稱:    Chelidonine    :    476-32-4    分子式:    353.37    分子量:    C20H9NO5
白術內(nèi)酯I    英文名稱:    AtractylenolideI    :    73069-3-3    分子式:    230.30222    分子量:    C5H8O2
白術內(nèi)酯III    英文名稱:    AtractylenolideIII    :    73030-7-4    分子式:    248.375    分子量:    C5H20O3
白頭翁素    英文名稱:    Anemonin    :        分子式:    92.7    分子量:    C0H8O4
白楊素    英文名稱:    Aspen    :    480-40-0    分子式:    254.24    分子量:    C5H0O4SDS-PAGE 濃縮膠配膠液    500mL    
40588-250    Verhoeff 固定液    250 mL
329N-00    轉(zhuǎn) Lectin 基因植物 PCR Mix    00 次
60406-50    RNA  b-Mercaptoethanol(2- 乙醇 )    50mL
2-4    SMD68 酵母菌種    mL
SSC 溶液 ,20×    00mL    
CAS4578-3-8    5'- 單磷酸苷二    5g
2-030-5     上皮細胞生長因子 -2    5mL
小鼠肥大細胞類(MCT)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格堿性膠電泳液 ,0×    250mL    
一氧化氮檢測試劑盒 ( 化學法 )    00 T    
Bouin 固定液    250 mL    
PCR 優(yōu)化試劑盒    套    
96 孔板質(zhì)粒 DNAout( 離心法 )    次    
    25g    
柱式骨骼 DNAout    50 次    
角質(zhì)細胞生長因子 - 不含 BPE    5mL    

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